微生物elisa檢測(cè)試劑盒是一種快速檢測(cè)試劑盒,基于DNA檢測(cè)的樣品的前處理方法,通過(guò)PCR,能夠在4小時(shí)內(nèi)富集樣本并檢出特定微生物,非常適合食品飲料行業(yè)、政府部門科研單位、藥企等快速檢測(cè)檢測(cè)致病菌等特定微生物。
1、待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2、酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
3、洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4、陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
5、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
6、洗板,同(4)。
7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
8、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
9)洗板,同(4)。
10、每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
12、分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13、數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
微生物elisa檢測(cè)試劑盒的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):
1、*試劑:性、靈敏性、特異性。
2、規(guī)范包被操作:吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高。
3、先進(jìn)的優(yōu)化方案:回收利用率高、可靠性強(qiáng)。
4、適用范圍:適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等。
6、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。