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人ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣

發(fā)布時間:2018-08-15   點(diǎn)擊次數(shù):2385次
   人ELISA檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣
  
  人ELISA檢測試劑盒實驗操作時需注意事項:
  
  1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣
  
  2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  
  3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  
  4.配液:將30(48t的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48t的20倍)倍稀釋后備用。
  
  5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  
  6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
  
  7.溫育:操作同3。
  
  8.洗滌:操作同5。
  
  9.顯色:每孔先加入顯色劑a50μl,再加入顯色劑b50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  
  10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  
  11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(od值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
  
  人ELISA檢測試劑盒范圍:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
  
  人ELISA檢測試劑盒特點(diǎn):敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
  
  人ELISA檢測試劑盒用途:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
  
  人ELISA檢測試劑盒檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
  
  樣本類型:適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞上清、組織勻漿等樣本。
  
  ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
  
  
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