供應(yīng) IFN-β,β干擾素ELISA試劑盒檢測(cè)類型
試劑盒名稱 | β干擾素ELISA檢測(cè)試劑盒 | |
規(guī)格 | 48T/96T | |
品牌 | RENJIEBIO | |
檢測(cè)方法 | ELISA酶聯(lián)免疫法 | |
檢測(cè)波長(zhǎng) | 450nm | |
樣本 | 血清、血漿、細(xì)胞上清液等 | |
樣本體積 | 50~100ul | |
研究領(lǐng)域 | 神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、免疫學(xué)等 | |
使用范圍 | 僅用于科研實(shí)驗(yàn) | |
保存 | 2~8℃,避光保存 |
β干擾素ELISA試劑盒操作流程如下:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?br />(6)洗板,同(4)?!?br />(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl?!?br />(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min?!?br />(9)洗板,同(4)?!?br />(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min?!?br />(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
IFN-β,標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算