大鼠CD80分子ELISA檢測試劑盒-操作步驟
結(jié)果判斷
1. 30分鐘內(nèi)在波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
2.以OD值為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),繪制曲線圖;
3.根據(jù)樣品的OD值查找對應(yīng)的濃度范圍;
4.敏感度:0.1 ng/ml
液體類標(biāo)本:
包括血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清液等。
血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中如有沉淀,請再次離心。
血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,在離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
尿液:
用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,當(dāng)細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并釋放細(xì)胞內(nèi)的成份,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。
組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆茫瑯?biāo)本融化后仍保持2-8℃的溫度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,分裝后留一份待檢測,其余冷凍備用。
組成成分:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 8孔×12條 | 8孔×6條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 無 |
底物B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2張 | 2張 | 無 |
說明書 | 1份 | 1份 | 無 |
自封袋 | 1個 | 1個 | 無 |