国产成人亚洲精品狼色在线-欧美亚洲国产精品久久高清-亚洲欧洲av一区二区久久不卡-亚洲卡通av动漫一区二区

歡迎來到上海仁捷生物科技有限公司網(wǎng)站!
技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 小鼠ELISA檢測試劑盒是應(yīng)用了什么原理進行實驗的?

小鼠ELISA檢測試劑盒是應(yīng)用了什么原理進行實驗的?

發(fā)布時間:2020-10-23   點擊次數(shù):957次
  小鼠ELISA檢測試劑盒的實驗原理:                                     
  將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

  小鼠ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理方法:
  1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
  2、血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
  3、細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清
  4、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用
  5、培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
 
  小鼠ELISA檢測試劑盒的注意事項:
  1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuì好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  4、請每次測定的同時做標準曲線,zuì好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第1孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物請避光保存。
  7、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
  8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  9、本試劑不同批號組分不得混用。
  10、如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
蓬安县| 启东市| 伽师县| 岳阳市| 小金县| 宁乡县| 永顺县| 余干县| 洪洞县| 昆明市| 景德镇市| 阿勒泰市| 平顶山市| 育儿| 清丰县| 望都县| 尤溪县| 营山县| 永靖县| 太仆寺旗| 永寿县| 黑山县| 景德镇市| 永川市| 巩留县| 同心县| 吴堡县| 皮山县| 陆良县| 镇坪县| 巩留县| 宽甸| 双柏县| 张家界市| 徐州市| 尖扎县| 勐海县| 湖州市| 剑阁县| 和林格尔县| 宁陕县|