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魚elisa檢測試劑盒的性能及操作步驟說明

發(fā)布時間:2020-04-26   點擊次數:1770次
   魚elisa檢測試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在各領域中。
 
  魚elisa檢測試劑盒的性能:
  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
  靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 ng/mL。
  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
  重復性:板內變異系數小于10%、板間變異系數小于15%。
  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
 
  操作步驟:
  1、編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔。
  2、加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
  5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
  6、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
  7、溫育:操作同3。
  8、洗滌:操作同5。
  9、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。
  10、終止:每孔加終止液50μl,終止反應。
  11、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
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